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专利号 2020101479112 申请日 2020-03-05 专利名称 一种大型基因簇的无痕定点改造方法及其应用
授权日 2023-01-24 专利权人 山东大学 发明人 王海龙;宋超逸;栾霁;符军;张友明
主分类号 C12N15/70 关键词 应用领域
摘要 本发明涉及一种大型基因簇的无痕定点改造方法及其应用。本发明中的无痕定点改造方法首先利用Redαβ线环重组将含有目标DNA‑正向筛选标记‑反向筛选标记组成的基因盒插入靶位点得到重组载体,其中正向筛选标记‑反向筛选标记两侧带有特异性限制酶切位点和末端同源臂;随后重组载体经特异性限制酶切线状化,暴露出末端同源臂;最后在核酸外切酶介导的体外退火作用下,线状DNA分子通过末端同源臂环化完成DNA的无痕修饰。本发明中的无痕定点改造方法可以高效的编辑生物合成途径,在大型聚酮基因簇中进行DNA插入、删除等无痕定点修饰,从而有目的的改变聚酮骨架结构或进行糖基修饰,为聚酮化合物生物合成途径的改造提供了便利。
创新点
技术分类 标 签 战兴产业 生物产业    生物农业及相关产业
运营方式 合作方式
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