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专利号 2020105008039 申请日 2020-06-04 专利名称 一种单链环状DNA的制备方法
授权日 2022-01-07 专利权人 中国海洋大学 发明人 梁兴国;刘梦琴;王伟男;隋哲;安然
主分类号 C12N15/10 关键词 应用领域
摘要 本发明属于核酸技术领域,涉及一种单链环状DNA的制备方法,通过PCR制备出其中一条链的5′端带有磷酸基团的中等长度的单磷酸化双链DNA,然后将环化反应所需的中等长度的单磷酸化双链DNA与辅助环化的模板DNA按照一定比例混合,加入耐热连接酶和反应缓冲液混合配制成连接反应体系,进行高温变性和降温连接的多次循环,制得只有一条链环化的双链产物;从中纯化分离出已环化的单链环状DNA,并进行电泳检测。该方法不需要制备单链DNA,直接以中等长度双链DNA为原料,采用双链变温循环连接反应高效制备中等长度单环DNA;酶法连接成环能够打开中等长度双链DNA复杂的二级结构,提高中等长度单链环状DNA的产率。
创新点
技术分类 标 签 战兴产业 生物产业    生物农业及相关产业
运营方式 合作方式
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【关 闭】