| 专利号 | 2020105008039 | 申请日 | 2020-06-04 | 专利名称 | 一种单链环状DNA的制备方法 |
| 授权日 | 2022-01-07 | 专利权人 | 中国海洋大学 | 发明人 | 梁兴国;刘梦琴;王伟男;隋哲;安然 |
| 主分类号 | C12N15/10 | 关键词 | 应用领域 | ||
| 摘要 | 本发明属于核酸技术领域,涉及一种单链环状DNA的制备方法,通过PCR制备出其中一条链的5′端带有磷酸基团的中等长度的单磷酸化双链DNA,然后将环化反应所需的中等长度的单磷酸化双链DNA与辅助环化的模板DNA按照一定比例混合,加入耐热连接酶和反应缓冲液混合配制成连接反应体系,进行高温变性和降温连接的多次循环,制得只有一条链环化的双链产物;从中纯化分离出已环化的单链环状DNA,并进行电泳检测。该方法不需要制备单链DNA,直接以中等长度双链DNA为原料,采用双链变温循环连接反应高效制备中等长度单环DNA;酶法连接成环能够打开中等长度双链DNA复杂的二级结构,提高中等长度单链环状DNA的产率。 | ||||
| 创新点 | |||||
| 技术分类 | 标 签 | 战兴产业 | 生物产业  生物农业及相关产业 | ||
| 运营方式 | 合作方式 | ||||
| 联系人 | 联系电话 | 电子邮箱 | |||
| 详细说明 | |||||