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专利号 201610240529X 申请日 2016-04-18 专利名称 一种快速实现地衣芽孢杆菌基因敲除的方法
授权日 2019-11-05 专利权人 齐鲁工业大学 发明人 王瑞明;汪俊卿;韩海红;韩登兰;王腾飞;肖静
主分类号 C12N15/75 关键词 应用领域
摘要 本发明涉及一种快速实现地衣芽孢杆菌基因敲除的方法。包括以下步骤:(1)获取地衣芽孢杆菌中拟敲除基因编码框内一段基因片段作为同源臂序列;(2)获取抗性标签基因片段;(3)通过对同源臂序列和抗性标签基因片段进行重叠延伸PCR,获得包含同源臂序列和抗性标签基因片段的融合基因序列,并作为基因敲除片段使用;(4)对融合基因序列进行单酶切,转化地衣芽孢杆菌感受态细胞,经复苏培养和筛选培养后,制得基因敲除的地衣芽孢杆菌。本发明基于单交换原理进行地衣芽孢杆菌基因敲除,敲除过程仅需产生一次同源重组即可,整合过程高效;整个敲除和筛选工作可以在3~4天内完成,基因敲除周期短,并有效降低敲除成本。
创新点
技术分类 标 签 战兴产业 生物产业    生物农业及相关产业
运营方式 合作方式
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